色谱法中蕞常用的溶剂之一。它易于获得,并且可以通过旋转蒸发轻松去除。然而,乙酸乙酯在为乙酸乙酯的替代品。丙酮比乙酸乙酯稍微更具有极性,使得某些化合物的洗脱速度更快。
使用丙酮作为Flash溶剂的主要原因是它不吸收短波长。如图1所示,丙酮在220纳米以下的波长范围内没有吸收,而乙酸乙酯在这一范围内有吸收。这使得丙酮适用于吸收在220纳米或更少的化合物的梯度Flash色谱法。
常用的乙酸乙酯具有“末端吸收”(即在接近200纳米的波长处,这通常是紫外检测器的范围末端),因此使用这种溶剂时,很难检测到具有相似吸收特性(低波长波段)的化合物。
合成和纯化3-(2-硝基苯胺)丙月青为使用丙酮进行纯化提供了一个示例。后文范例为以丙酮醇化3-(2-硝基苯胺)丙月青及其反应副产物。
在一个圆底烧瓶中,加入对硝基苯胺(25.084克),溶解在无水乙醇(125毫升)中。反应混合物加热至80°C,然后加入Triton B(3.8毫升)。在搅拌的反应混合物中加入丙烯腈(35毫升),并在80°C下搅拌24小时。混合物在旋转蒸发器上蒸发,得到一种棕色油状物。
将油状物溶解在40毫升的乙酸乙酯中。向溶液中加入活性炭(1.6克),然后进行过滤。加入庚烷(50毫升),加热至沸腾后让其冷却。两天后,收集到深棕色晶体,得到6.3克纯产品,即3-(2-硝基苯胺基)丙月青。
一个由对硝基苯胺和3-(2-硝基苯胺基)丙月青按50:50比例组成的30毫克样品,使用表1中的参数进行了分离。
或者,可以通过简单地将反应混合物吸附到硅胶上并在RediSep柱上运行混合物(可以固体上样后以RediSep正向柱纯化)来取代结晶法纯化步骤。一个330克的柱子可以轻易地容纳1/6的反应混合物。即使需要进行六次运行,也可以节省一天的时间,并且产率会更高,因为3-(2-硝基苯胺基)丙月青仍然留在结晶后的上清液中。
2:在210纳米处检测对硝基苯胺和3-(2-硝基苯胺基)丙月青的梯度洗脱
3:在210纳米处检测对硝基苯胺和3-(2-硝基苯胺基)丙月青的梯度洗脱,以及更高的样品加载量
由于丙酮比乙酸乙酯更具极性,使用丙酮会使化合物更快地洗脱,从而缩短运行时间并节省溶剂。丙酮的成本几乎是乙酸乙酯的一半,这可以带来显著的经济节约。
己烷/丙酮通常用于纯化天然产物。它可以以高浓度(高达100%)使用,而甲醇通常被认为会溶解硅胶。丙酮也是一种有用的中极性溶剂。
Flash允许用户在一次运行中轻松从己烷/丙酮梯度洗脱切换到甲醇,从而洗脱出极性范围广泛的化合物。CombiFlash系统最多有四个溶剂入口,便于溶剂切换。
丙酮确实存在一些不足之处。首先,丙酮容易从空气中吸收水分,因此不使用时应将瓶盖密封好。在冲提TLC板时,应使用新鲜的丙酮。其次,丙酮会吸收波长超过220纳米的紫外光,因此对于仅在254纳米下工作的检测器,丙酮并不适用。
对于在220纳米以下波长处有吸收且不吸收254纳米紫外光的化合物,可以使用丙酮代替乙酸乙酯。丙酮是乙酸乙酯的一种更经济的替代品。
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